Reattivo di Lugol

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Categoria:	Biologia
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Data:	14.11.2001
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TITOLO: Reattivo di Lugol.
OBIETTIVO: Preparare il reattivo di Lugol.
PRINCIPIO BIOLOGICO:
Colorazioni semplici dei microrganismi.
Realizzando una colorazione semplice si ottiene una descrizione piщ dettagliata della morfologia della cellula. I microrganismi in condizioni vitali impediscono il passaggio dei coloranti per questo motivo le cellule, prima del processo di colorazione, vengono trattate con il calore per ucciderle.
I coloranti sono composti organici costituiti da un gruppo cromoforo, caratterizzando il colore specifico e un gruppo auxoromo responsabile del legame con il preparato.
Per i batteri si utilizzano i colori all’anilina e si distinguono in acidi e basici, i iщ usati sono quelli basici, ad esempio blu di metilene, violetto di genziana, fuxina basica.
Tra i coloranti acidi, ricordiamo la fuxina acida e la microsina.
La preparazione delle soluzioni coloranti si compone di due fasi:
costituzione di una soluzione macroalcolica (10 mg coloranti a 100 mi di alcol etilico);
preparazione di soluzioni idrolacoliche (10 mg di soluzione madre e 90 ml di acqua distillata).
Nel caso si desideri aumentare l’effetto della colorazione si utilizza un mordenzante, sostanza capace di fornire l’ingresso del colorante con gli elementi strutturali della cellula. Vengono utilizzati i seguenti mordenzanti:
acido fenico;
soluzione iodurata (Lugol);
tammino.
Il reattivo di Lugol si prepara con 1 gr di iodio, 1 gr di ioduro di potassio e 100 ml di acqua distillata.
MATERIALE UTILIZZATO:
ioduro di potassio;
iodio;
spruzzetta contenente acqua distillata;
becher da 100 ml;
2 vetrini ad orologio;
crogiolo;
pestello;
bacchetta;
bilancia.
PROCEDIMENTO:
per prima cosa, sono stati presi 2 vetrini ad orologio;
con l’uso della bilancia sono stati pesati 1,124 gr di iodio e 1,150 gr di ioduro di potassio prelevati dai rispettivi contenitori;
i grammi di iodio sono stati inseriti nel crogiolo con qualche goccia di acqua distillata, contenuta nella spruzzetta, e fatti sciogliere mediante l’uso del pestello.
i grammi di iodio sono stati versati all’interno di un becher da 100 ml e con l’uso della bacchetta sono stai mescolati e pestati aggiungendo acqua distillata, naturalmente poco per volta.
i grammi di ioduro di potassio sono stati inseriti anch’essi nel crogiolo, sempre con qualche goccia di acqua distillata, e versati in seguito insieme ai grammi di iodio continuando a pestare e mescolare, sempre con l’uso della bacchetta, la miscela ottenuta con acqua distillata fino ad arrivare al limite segnato dal becher.
Successivamente la miscela ottenuta и stata poi versata all’interno di una bottiglietta.
CONCLUSIONI:
Si и avuto modo di preparare un colorante, in questo caso il Lugol, utilizzato per prendere in esame le pareti cellulari dei microrganismi presi in esame.
OSSERVAZIONI:
Il colore del reattivo di Lugol и stato scuro, per cui si puт dire che l’esperienza и riuscita.