La Genetica

Materie:	Tesina
Categoria:	Biologia
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Data:	06.10.2006
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geTesi di genetica

Introduzione
A partire dal 17° secolo, vennero trovate dimostrazioni sperimentali al fatto che la vita genera vita (omne vivum ex vivo), e non che la vita и generata per generazione spontanea della materia organica. Ad esempio: F. Redi: le larve delle mosche nascono da uova deposte da altre mosche, e non dalla carne in decomposizione. L.Spallanzani: dimostrт che gli infusori, come il paramecio, non nascono dagli infusi di fieno, ma da unicellulari in quiescenza, riattivati dall'acqua. E infine L. Pasteur: provт che neppure i batteri nascono per generazione spontanea, bensм da batteri preesistenti.
Per gli individui unicellulari, la continuitа и data semplicemente dalla ripartizione del materiale genetico, nei pluricellulari (che si riproducono sessualmente), la continuitа и data dalle cellule sessuali (i gameti). All'epoca c'erano due teorie contrastanti sulla trasmissione dell'ereditarietа, cioи quella preformista (organismo preformato in uno dei gameti, ad es. nello spermatozoo ? homunculus) e quella dell'epigenesi (ricostituzione a partire da elementi amorfi, per generazione spontanea). Oggi sappiamo che la formazione dell'organismo avviene gradualmente, sotto il controllo dei geni, detti anche determinanti ereditari. Schleiden e Schwann nel 1838 enunciarono la teoria cellulare, secondo la quale tutti gli organismi sono formati da cellule e da sostanze da esse prodotte. Ne deriva l'assunto di Wirchow, secondo cui ogni cellula deriva unicamente da un'altra cellula. Quindi nel riprodursi le cellule mantengono la propria continuitа genetica, che garantisce l’ereditа biologica e la relativa costanza della specie.
Citologia
Membrana cellulare: doppio strato di fosfolipidi (struttura a mosaico fluido) con proteine (Karier ? trasporto attivo, recettori, glicoproteine ? riconoscimento). Regola gli scambi (permeabilitа selettiva).
Citoplasma: denso, contiene molti enzimi ? avvengono molte reazioni, contiene tutti gli organelli.
Mitocondri: forma a bastoncello, doppia membrana, quella interna ? creste (> sup. rel.), ha un liquido ? matrice, contiene enzimi, ribosomi e un filamento di DNA (teoria Margulis). Vi avvengono le reazioni che producono energia.
Reticolo endoplasmatico: doppio strato di fosfolipidi, compartimenta la cellula ? serie di divisioni (cisterne), dove si concentrano gli enzimi necessari alla stessa reazione per aumentare al massimo la velocitа. Liscio ? grassi e lipidi, ruvido ? proteine.
Apparato del Golgi: doppio strato di fosfolipidi, pila di vescicolette contenenti enzimi tramite i quali avviene la maturazione ? riorganizza e immagazzina le sostanze di riserva prodotte dal reticolo.
Lisosomi: vescicoletta contenente tutti gli enzimi idrolitici avvolta da un doppio strato di fosfolipidi. Prodotti dal Golgi. Degrada macromolecole portate nella cellula per endocitosi.
Ribosomi: legati al reticolo o liberi nel citoplasma, 2 subunitа (r-RNA + proteine). Fondamentali nella biosintesi proteica.
Centrioli: 9 triplette di microtubuli di natura proteica, equa ripartizione dei cromosomi (M! e R!)
Citoscheletro: microtubuli di natura proteica, dа robustezza e determina il movimento.
La cellula vegetale ha tutto questo (tranne i centrioli), ma ha in piщ la parete cellulare, i vacuoli e i plastidi.
Il nucleo
La struttura-chiave per la riproduzione cellulare e il controllo delle funzioni cellulari, in cui si trovano le strutture depositarie dei caratteri ereditari, и il nucleo. Esso и separato dal resto della cellula dalla membrana nucleare (porzione specializzata del reticolo endoplasmatico), formata da 2 membrane. Contiene un nucleolo che produce i ribosomi e li scarica nel citoplasma. La membrana esterna и in continuitа col reticolo. Le 2 membrane si uniscono in molti punti, dando luogo a pori nucleari (8 subunitа disposte ad anello), grazie ai quali tra il nucleo e il citoplasma avvengono continui scambi di ioni e molecole (es. nucleotidi verso nucleo, RNA verso citoplasma). Quindi la riproduzione, il differenziamento e il funzionamento della cellula non sono solo opera del nucleo, ma nascono da complesse interazioni tra esso e il resto della cellula.
Mitosi (M!)
La mitosi и un processo di divisione cellulare, in cui a partire da una cellula madre si formano 2 cellule figlie, identiche tra loro ed identiche alla cellula madre.
Funzioni: a) unicellulari: riproduzione
b) pluricellulari: 1) accrescimento ( i pluricellulari derivano da un’unica cellula, in seguito i tessuti si sono differenziati perchй a seconda della funzione viene letta solo una parte di DNA)
2) sostituzione delle cellule invecchiate (alcune cellule (es. nervose) hanno vita lunga e non fanno piщ mitosi, altre (es. parete stomaco) hanno vita piщ breve e vengono continuamente sostituite)
La mitosi e l’interfase formano il ciclo cellulare, la cui lunghezza puт variare (da cellula a cellula e in base alle condizioni ambientali) da 8 ore a 100 giorni e piщ. In generale, l’interfase costituisce il 90% del ciclo cellulare, mentre la mitosi il 10%.
L’interfase costituisce la fase tra una mitosi e l’altra. Essa si divide in fase G1, S e G2.
G1 (da gap ? intervallo)
In questa fase la cellula, appena uscita dalla mitosi, si accresce raggiungendo le dimensioni normali, duplica i suoi organelli e produce proteine, soprattutto quelle necessarie alla duplicazione del DNA. Se la cellula non deve piщ dividersi, si ferma a questa fase e si specializza.
S (da sintesi)
Qui avviene la duplicazione del DNA. L’enzima DNA-polimerasi rompe i ponti-H tra le catene ? il DNA si apre e sempre la DNA-polimerasi fa legare i nucleotidi complementari. La duplicazione и semiconservativa ? le 2 molecole risultanti posseggono ciascuna un’elica della molecola madre e una neosintetizzata. Si formano 2 cromatidi uniti in un punto detto centromero: la zona del centromero non и ancora stata duplicata: l’intera struttura и detta cromosoma metafasico. Vengono prodotte le proteine istoniche.
G2
Vengono sintetizzate le proteine necessarie alla spiralizzazione del DNA.
Fasi della mitosi
Profase: La cromatina spiralizza ? si evidenziano i cromosomi metafasici: in questo modo il DNA viene piщ facilmente ed equamente ripartito tra le cellule figlie. Si dissolve la membrana nucleare e i centrioli iniziano a migrare ai poli della cellula.
Metafase: Si forma il fuso mitodico (fibre di natura proteica), di cui i centrioli sono il punto di raccordo. I cromosomi metafasici si portano in piastra equatoriale e si fissano al fuso per il centromero trasversalmente.
Anafase: Il fuso si contrae ? i cromosomi metafasici si spaccano al centromero ? la zona del centromero viene duplicata e i due cromatidi iniziano a migrare ai poli.
Telofase: c’и una strozzatura a livello equatoriale. Le 2 cellule ci separano, i centrioli si dividono, si riforma la membrana nucleare e i cromosomi si srotolano, riformando la cromatina.
La mitosi nelle cellule vegetali и uguale fino alla telofase, ma in quest’ultima si presentano avvenimenti del tutto peculiari perchй, essendoci la parete cellulare, non puт avvenire la strozzatura. Per questo sono coinvolti gli apparati del Golgi (che in quel momento sono 2): essi producono delle vescicolette ricche di cellulosa che, guidate dal reticolo endoplasmatico, si portano verso l’asse equatoriale dove, grazie all’unitа di membrana, si fondono, formando una struttura detta lamella mediana, all’inizio molto sottile, che diventa sempre piщ spessa. Le 2 cellule formano poi le proprie pareti sulla lamella mediana. La lamella tiene unite le 2 cellule, avendo proprietа adesive. И interessante notare come il fuso mitodico venga completamente avvolto dalla cellulosa: si formano cosм ponti di cellulosa tra le due pareti, che costituiranno in seguito i porocanali.
Nella mitosi da una cellula madre si sono formate 2 cellule figlie, identiche tra loro e identiche alla cellula madre.
Meiosi (R!)
La meiosi и un processo di divisione cellulare in cui a partire da una cellula madre si formano 4 ? figlie, tutte diverse tra loro e con la metа del patrimonio genetico della cellula madre.
Funzioni: riproduzione ? la meiosi ha un ruolo centrale nella gametogenesi: infatti, siccome nella riproduzione sessuata avviene una fusione tra il gamete maschile e quello femminile, и necessario che i gameti (con un numero n di cromosomi ? aploidi) abbiano la metа del corredo cromosomico di una cellula somatica (con 2n cromosomi ? diploidi), di modo che fondendosi formino uno zigote con il patrimonio genetico completo (n+n=2n), di cui la metа di origine paterna e l’altra materna.
La meiosi interessa unicamente le cellule destinate alla riproduzione. La meiosi и formata da 2 divisioni cellulari successive, senza che tra le due avvenga la duplicazione del DNA: la prima и detta riduzionale, perchй riduce il numero di cromosomi della cellula da 2n (diploide) a n (aploide), e la seconda equazionale, perchй lascia inalterato il numero di cromosomi.
cellula diploide ? n coppie di cromosomi omologhi, cioи che portano gli stessi caratteri
cellula aploide ? n cromosomi
Meiosi I
Profase: molto piщ lunga e complessa di quella della mitosi: la cromatina si condensa formando i cromosomi metafasici, poi i cromosomi omologhi si appaiano lungo tutta la loro lunghezza formando delle strutture dette tetradi. Quindi cominciano ad allontanarsi rimanendo uniti in punti detti chiasmi. A livello di questi chiasmi avviene il crossing-over ? scambio di materiale genetico (di tipo chimico) tra cromosomi omologhi. Il crossing-over aumenta moltissimo la variabilitа genetica, ricombinando casualmente il materiale genetico. Sempre in questa fase si dissolve la membrana nucleare, i centrioli migrano ai poli e iniziano a formare il fuso.
Metafase: le tetradi si allineano in piastra equatoriale longitudinalmente ? i centromeri si fissano al fuso e gli interi cromosomi migrano ai poli della cellula.
Anafase: si completa la migrazione dei cromosomi.
Telofase: avviene la divisione delle 2 cellule e la riformazione della membrana nucleare.
Al termine della meiosi I si sono formate 2 cellule aploidi. La meiosi II и sostanzialmente uguale alla mitosi, ma con un corredo cromosomico dimezzato. Inoltre la profase и molto piщ rapida perchй la cromatina и giа spiralizzata. Alla fine della meiosi II si formano 4 cellule figlie, tutte diverse tra loro e aploidi, cioи con un patrimonio genetico dimezzato rispetto alla cellula madre.
Quindi nella meiosi a partire da una cellula diploide si formano 4 cellule aploidi, tutte diverse fra loro.
Alcune differenze tra mitosi e meiosi
La mitosi si effettua nelle cellule somatiche dell’organismo, mentre la meiosi и limitata alle cellule destinate alla riproduzione.
Nella mitosi le due cellule figlie hanno lo stesso numero di cromo¬somi, mentre nella meiosi si ha la produzione di cellule aploidi.
Nella mitosi i cromosomi si comportano indipendentemente l'uno dall'altro. Nella meiosi interviene
nei cromosomi omologhi una relazio¬ne di reciproca dipendenza meccanica: il crossing over.
Nella mitosi le cellule figlie sono identiche per quanto concerne il patrimonio genetico, mentre la
meiosi produce cellule diverse dal punto di vista genetico. Questa variabilitа и dovuta alla casuale migrazione dei cromosomi e al crossing-over.
La mitosi si svolge in un tempo relativamente breve, con una durata di circa una o due ore, la
meiosi и un processo piщ lungo. Nel maschio della specie umana, ad esempio, il compimento del
ciclo meiotico puт richiedere 24 giorni, e nella donna parecchi anni.
I cromosomi
La cromatina venne scoperta nel 1879 da Flemming, grazie a coloranti basici. Piщ tardi vennero scoperti anche i cromosomi. Cromatina e cromosomi sono due stati morfologici diversi delle stesse entitа funzionali (DNA e proteine): il 1° stato (cromatina) и caratteristico dell'interfase, il 2° (cromosoma) invece della mitosi. Essi possono essere ben studiati quando sono condensati, specialmente durante la metafase della mitosi. Ogni cromosoma и formato da molecole costanti come il DNA, quasi sempre associato a particolari proteine dette istoni, e da biomolecole transitorie come RNA, ...? ogni cromosoma и un'entitа cellulare in equilibrio dinamico. I cromosomi sono i responsabili dello stoccaggio, trasmissione e espressione del codice genetico, infatti il depositario dell'informazione genetica и il DNA. I cromosomi presentano numero e caratteri morfologici individuali, costanti in tutte le cellule dello stesso organismo e in tutti gli organismi di una stessa specie. Il DNA si avvolge attorno agli istoni (5 forme fondamentali: H1, H2A, H2B, H3, H4), che formano un ottamero (due H4 combinati con due H3 che formano un tetramero affiancato da due dimeri H2A e H2B) Ogni molecola di istone protrude una coda, pronta a interagire con le altre molecole. L’istone H1 contribuisce a legare il DNA alla fibrilla centrale. L’insieme forma un nucleosoma.
Il nucleosoma и l'unitа strutturale della cromatina, responsabile della sua condensazione. L'insieme di molti nucleosomi forma la fibra nucleosomica. Essa puт avere struttura a solenoide (6 nucleosomi per avvolgimento) o a nastro elicoidale (i nucleosomi formano una doppia elica a zigzag ? supercoiling). Due nucleosomi consecutivi sono separati da una regione (80 pb), chiamata DNA linker. Il DNA compie 2 giri attorno a ogni ottamero, e i nucleosomi sono legati da molecole di istone H1, che sono piщ grandi delle altre e interagiscono tra loro, aumentando la condensazione. Inoltre ogni istone puт presentare varie isoforme, codificate da geni diversi: questo ha sicuramente partecipato alla regolazione dell'espressione del genoma (in particolare la coda di H4 ha facilitato la trascrizione di geni, altre parti invece la repressione di altri geni).
La compattazione della cromatina procede in diverse tappe: innanzitutto il DNA viene costituito in nucleosoma, viene poi incorporato l'istone H1. A questo punto inizia la condensazione progressiva della cromatina ? formazione di una rete interstiziale proteica. Infine si costituisce una vera membrana nucleare.
Per definire la topografia e la disposizione dei geni nei cromosoma si ricorre all'elaborazione di mappe cromosomiche:
1) Analisi d'associazione (linkage) dei geni: determinando la frequenza con cui diverse forme di 2 caratteri vengono ereditati, o confrontando le sequenze di basi di regioni corrispondenti in diversi individui.
2) Stesura di mappe fisiche: si isola il DNA e lo si taglia in vari frammenti, si effettuano poi copie per clonazione( metodo non selettivo per ottenere tratti molto lunghi), estraendo i cloni piщ interessanti.
3) Analisi tramite P.C.R. (Polymerase Chain Reaction): и un sistema in vitro per sintetizzare o amplificare selettivamente milioni di copie di un breve tratto del DNA.
Il DNA e il codice genetico
Il genoma umano и formato da 46 molecole a doppia elica di DNA (6 pg), ogni molecola in media и formata da 130 milioni di pb lineari, ognuna supportata da uno zucchero (desossiribosio) e da un fosfato. Ciascuna si avvolge attorno agli istoni a formare il cromosoma. Nell'insieme il genoma contiene 6 x 109 pb. La molecola di DNA и un polimero i cui monomeri sono i nucleotidi. Un nucleotide и formato da un gruppo fosfato che lega uno zucchero pentoso (ribosio o desossiribosio), il quale a sua volta lega una base azotata. Lo zucchero si lega col C1 alla base azotata, col C3 al fosfato sotto e col C5 al fosfato sopra.
Le due catene sono tenute assieme da ponti-H, per certe restrizioni spaziali imposte dalla struttura a doppia elica, sono possibili solo due tipi di associazioni complementari tramite ponte-H: tra Adenina e Timina (A-T) con 2 ponti, o tra Citosina e Guanina (C-G) con 3 ponti. A e G sono purine (2 anelli), C, T e U sono pirimidine (1 anello). I nucleotidi in una molecola seguono una sequenza rigorosa: quelli dell'elica sorella sono complementari.
Il programma per sintetizzare le proteine и codificato nella sequenza nucleotidica del DNA. Visto che i nucleotidi sono 4 (A, T, C, G), mentre gli aa 20, un nucleotide non basta per identificare un aa (4 comb. possibili), e nemmeno 2 (16 comb.). Il minimo и di 3 nucleotidi per 1 aa. A ogni tripletta di nucleotidi corrisponde un aa: essa costituisce un'unitа di codice o codone. Il codice viene detto degenerato, poichй piщ codoni identificano lo stesso aa (principio della ridondanza). Ci sono 3 codoni di non senso (UAA, UAG, UGA), che non identificano nessun aa, ma rappresentano un segnale di termine della catena polipeptidica.
Caratteristiche del codice: - arbitrarietа (nessuna somiglianza tra aa e basi)
- universalitа (uguale per tutti gli organismi)
I geni: natura, trascrizione e traduzione
Il gene и un tratto di DNA che specifica una determinata proteina. Il DNA possiede sempre la stessa struttura in ogni essere, cioи 2 filamenti a doppia elica costituiti da sequenze di nucleotidi. Nei virus il DNA и racchiuso in una capside proteica, nei procarioti forma un unico cromosoma (nei batteri sono frequenti piccoli tratti circolari di DNA), invece negli eucarioti и associato a istoni, sono presenti a doppia coppia e si trovano nel nucleo.
Nel DNA puт variare il no di giri che un filamento compie attorno all'altro, i DNA che si differenziano per questo vengono detti topoisomeri. Inoltre l'asse della doppia elica puт arrotolarsi su sй stesso, formando una superelica (supercoiling), positiva se il no. di avvolgimenti cresce nello stesso senso (destrorso ? DNA B, la forma principale), e negativa se esso diminuisce, determinando uno srotolamento (sinistrorso ? DNA Z). Per tensione molecolare lo stato di superelica produce un inanellamento che rende l'insieme piщ compatto, ma anche piщ accessibile.
Il DNA и una struttura dinamica. Vi sono infatti presenti informazioni codificanti, strutturali e regolatrici, oltre che a sequenze mobili e tratti non codificanti.
1) Sequenze uniche mobili: Transposoni ? sono in grado di spostarsi da un punto all'altro della molecola di DNA. Alle loro estremitа viene ripetuta una breve barra invertita (ATGCA, TACGT). Possono inserirsi in un gene inattivandolo. Essi possono pure passare da un cromosoma all'altro. Retroposoni ? inserzioni mobili di DNA (di origine retrovirale), la cui trasposizione passa attraverso una forma di RNA. Dissociano i geni quando vi entrano ? probabilmente hanno avuto un importante ruolo nell'evoluzione.
2) Sequenze ripetitive: Nel genoma appaiono numerose sequenze ripetute molte volte. Alle estremitа ci sono i telomeri, indispensabili per evitare la degradazione del cromosoma. Lungo il genoma ci sono sequenze a elevata ripetitivitа (5000-7000 pb) ? LINE, e altre a bassa (alcune decine) ? SINE.
3)Sequenze regolatrici: Costituite da 6-8 nucleotidi. Sono regolatori proteici, capaci di adeguare l'intensitа di trascrizione alle necessitа cellulari ? attivatori o rafforzatori (enhancers) e inibitori (silencers). La regione di controllo in vicinanza del sito d’iniziazione della trascrizione viene detta promotore, ed и dotata di una sequenza di 6 nucleotidi ricca di A e T ? TATA-box. Mutazioni a livello dei TATA-box portano a un’inibizione del 50-70 % della trascrizione. Oltre ai TATA-box, vi sono poi delle sequenze ricettrici di ormoni, che formando un complesso ormone-ricettore si fissa sul DNA, scatenando o bloccando la trascrizione.
L’RNA
L'RNA и costituito da nucleotidi, in cui lo zucchero и il ribosio, e la Timina и sostituita dall'Uracile. Esso и costituito da un solo filamento. Gli RNA sono prodotti sempre in rapporto al DNA, tramite l’ RNA-polimerasi, che lega i vari nucleotidi in una sequenza complementare a quella del DNA. Ci sono 3 tipi di RNA: r-RNA (ribosomale ? partecipa alla biosintesi), m-RNA (messaggero ? trascrizione del DNA) e t-RNA (di trasferimento ? lega gli aa). Questi ultimi sono costituiti da circa 80 nucleotidi; la catena ha una caratteristica forma a trifoglio, alla cui estremitа emerge una tripletta spaiata (CCA), con cui termina la catena.

La biosintesi proteica: trascrizione
Negli eucarioti si svolge nel nucleo cellulare. И un fenomeno selettivo: infatti non tutto il DNA viene trascritto, solo alcune parti. Le sequenze trascritte sono chiamate geni. Soltanto uno dei 2 filamenti viene trascritto. Da un solo gene, la trascrizione dа luogo a molti m-RNA ? amplificazione delle informazioni. La sintesi dell'm-RNA ha luogo in modo antiparallelo e complementare rispetto al DNA.
La trascrizione si svolge in varie fasi. Nei procarioti, i geni vengono trascritti e tradotti cosм come sono, invece negli eucarioti vi sono 2 fasi, vale a dire:
fase iniziale: Il messaggio genetico и frammentato, infatti un gene comprende gli esoni, cioи sequenze contenenti l'informazione ereditaria, che generalmente verranno trascritte e tradotte in proteine, e gli introni, cioи sequenze intercalari, che verranno trascritte ma non tradotte. Nella fase iniziale vi и la trascrizione integrale degli esoni e degli introni. Intervengono le RNA-polimerasi I, II, III: i 2 filamenti di DNA si scostano per rottura dei ponti-H, al passaggio dell'enzima, e ha luogo la trascrizione di un filamento di DNA. Subito dopo si riformano i ponti-H. L’enzima riconosce il punto d’inizio grazie a un promotore, che comprende anche il TATA-box. Il segnale di fine gene и una sequenza AATAAA, detta poliadenilazione.
b) fase di maturazione( processing): Il pre-m-RNA attraversa un insieme di modifiche. Splicing ? vengono eliminati gli introni grazie ai spliceosomi e assemblati gli esoni.
La biosintesi proteica: traduzione
Avviene nel citoplasma in cui l'm-RNA viene decodificato. Ci sono 3 fasi principali:
a) Fase di attivazione: L’aminoacil-t-RNA-sintetasi fa legare (con uso di ATP) ogni t-RNA al rispettivo aa, grazie all’elevata specificitа (ce ne sono 61). Ogni t-RNA contiene 2 siti specifici: il sito di legame dell’aa, e l’anticodone (che si legherа al rispettivo codone sull’m-RNA).
b) Fase d'elongazione: Gli aa vengono veicolati sotto forma di complesso attivato t-RNA-amminoacido. Il ribosoma assicura la corretta lettura del codice, facendo corrispondere al codone sull’m-RNA l’anticodone sul t-RNA. La catena polipeptidica si allunga con l'aggiunta progressiva di aa, legati tra loro grazie a enzimi (sintetasi, polimerasi). Per l'allungamento della catena sono indispensabili fattori d'elongazione (EF-T e EF-G). Infine, dopo ogni legame peptidico, il ribosoma si sposta sull'm-RNA (con uso di 2 GTP e 1 ATP).
c) Fase di rilascio: la catena polipeptidica и terminata, l'm-RNA termina con una tripletta di non senso, Il prodotto viene liberato dai ribosomi, grazie a 3 fattori di rilascio. Il prodotto puт sia rimanere nella cellula, sia essere esportato, in questo caso esso и provvisto di una sequenza segnale (una tipica и l'insulina).
La biosintesi delle proteine puт essere inibita sia nella trascrizione che nella traduzione da antibiotici.
Dogma Centrale: DNA RNA proteina (1 gene ? 1 proteina)
DNA DNA-polimerasi DNA ? REPLICAZIONE
DNA RNA-polimerasi m-RNA ? TRASCRIZIONE
m-RNA sintetasi + GTP proteina ? TRADUZIONE
La trasmissione dei caratteri ereditari
I geni, o determinanti ereditari, sono le unitа di informazione ereditaria che vengono trasmesse da una generazione alla successiva. Essi sono frazioni di DNA presenti nei cromosomi. Il gene puт presentarsi in 2 o piщ forme alternative, chiamate alleli (allele ? configurazione di un certo gene). Se un gene presenta almeno 2 diversi alleli si parla di polimorfismo. Il genotipo и l’insieme dei geni posseduti da un individuo per un carattere. Il fenotipo и la manifestazione esterna di un carattere. Il locus genico и la posizione specifica che un gene occupa nel cromosoma, quindi tutte le forme alleliche di un gene si trovano in posizioni corrispondenti su cromosomi geneticamente simili (i cromosomi omologhi). Tutti i geni di un cromosoma sono legati tra loro, si dice che appartengono allo stesso gruppo di associazione (linkage). Il genoma degli eucarioti ha due caratteristiche:
a) Ci sono troppi geni (genoma umano ? 8 milioni di geni). Si и ipotizzato che gran parte siano geni duplicati, regolatori, di riserva o residui evolutivi.
b) C’и una grande ripetitivitа. Si и teorizzato che queste sequenze abbiano un ruolo cruciale nella regolazione dell'espressione genica (? amplificazione ? controllo sul differenziamento cellulare). Meno del 10 % dell'informazione genomica viene trascritta.
Le leggi di Mendel
v v
V Vv Vv
V Vv Vv
Mendel impollinava fiori di pisello, castrati dell'apparato maschile, appartenenti a una linea pura, con componenti di un'altra linea pura, che perт differivano per un solo carattere. Per spiegare con maggiore chiarezza gli esperimenti viene utilizzata la griglia di Punnet. Mendel si accorse che, se si incrociano individui omozigoti che differiscono per una sola coppia di alleli, uno dei due alleli dominava sull'altro (era l’unico a manifestarsi nel fenotipo), e fu quindi chiamato dominante, l'altro invece recessivo. Il carattere dominante si manifesta sia allo stato omozigote che eterozigote, quello recessivo solo allo stato omozigote. Altri esperimenti (es. bocca di leone), hanno mostrato che nella F1 si manifestavano entrambi i caratteri degli ascendenti (da fiori rossi e bianchi ne risultavano rosa): quindi il fenotipo dei discendenti и una via di mezzo (ereditа intermedia), e questi alleli vennero perciт detti codominanti.
1a legge di Mendel (della dominanza o dell’uniformitа dei caratteri):
incrociando individui omozigoti che differiscono per una sola coppia di alleli, tutti i discendenti della 1a generazione filiale (F1) presenteranno uguale genotipo e uguale fenotipo, e vengono chiamati ibridi o eterozigoti.
Mendel proseguм reincrociando tra loro gli ibridi della F1, e osservт nella F2 il riapparire dei fenotipi della generazione parentale (P) e della F1.
2a legge di Mendel (della disgiunzione o della segregazione dei caratteri):
Incrociando tra loro gli ibridi della FI, nella seconda generazione filiale F2 ricompaiono i fenotipi portati dalla generazione parentale P e dalla F1. Le proporzioni fenotipiche sono di 3: 1, nel caso di discendenti dominanti o recessivi, e di 1:2:1, nel caso di codominanza.
Il riemergere nella F2 di caratteri della P dimostra che nella F1 i caratteri non si mescolano, ma conservano la loro individualitа, e perciт si separano intatti nella F2.
Reincrocio (Testcross): serve a determinare il genotipo di un individuo con fenotipo dominante: si incrocia questo individuo con uno dal fenotipo recessivo (sicuramente omozigote): se nella discendenza il 50% ha fenotipo dominante e il 50% recessivo, il genitore и eterozigote. Se invece tutti i discendenti presentano carattere dominante, il genitore и omozigote.
Alleli letali: sono geni la cui manifestazione fenotipica и la morte dell'individuo (possono insorgere per mutazione di un allele normale).Se и dominante, i portatori muoiono prima di riprodursi ? rimosso. Se invece l'allele и recessivo puт essere letale allo stato omozigote, ma non a quello eterozigote.
Differenze delle condizioni ambientali possono far sм che individui geneticamente identici mostrino fenotipi differenti. La percentuale di individui con una particolare combinazione di geni che mostra in qualsiasi grado il carattere corrispondente a quella combinazione rappresenta la penetranza. Poichй un carattere puт variare nella sua espressione (manifestazione evidente), il grado d'effetto prodotto da un genotipo penetrante viene detto espressivitа. Ad esempio nell'uomo il numero di dita soprannumerario и prodotto dall'allele dominante P. Invece le 5 dita sono date dall'omozigote recessivo pp. Perт alcuni individui Pp non sono polidattili, quindi l'allele P ha una penetranza inferiore al 100%. Un allele letale recessivo che manca di penetranza e espressivitа complete sarа letale per meno del 100% degli omozigoti, e per questo viene detto semiletale o subvitale.
Mendel incrociт anche soggetti che differivano per 2 caratteri (es. piselli ? colore, liscio/rugoso). Questi caratteri sembravano essere trasmissibili indipendentemente l’uno dall’altro.
3a Legge (dell'indipendenza dei caratteri) :
Incrociando individui che differiscono per 2 o piщ caratteri (diibridi o poliibridi), questi appaiono trasmissibili in modo indipendente, e seguono indipendentemente le prime due leggi. Le proporzioni numeriche sono di 9:3:3:1 (es. VVLL x vvll).
L'esperimento venne ripetuto da Morgan sul moscerino della frutta, con risultati molto vicini ai rapporti mendeliani. Prove di reincrocio effettuati su altri ceppi permettono di concludere che la trasmissione indipendente degli alleli avviene poichй essi sono localizzati su cromosomi diversi (quindi non sono geni associati).
Geni associati (linked genes)
Sono geni che non rispettano la 3° Legge di Mendel, perchй trovandosi sullo stesso cromosoma non sono trasmissibili indipendentemente l’uno dall’altro. Le principali ricerche sui geni associati ebbero come soggetto la drosofila. Quindi tutti i geni dello stesso cromosoma sono associati. Questo insetto ha sessi separati e un no cromosomico di 2n=8. Incrociando un ceppo di drosofila con caratteri selvatici (dominanti) con un ceppo dotato di ali atrofiche (vg) ed occhi color marrone (bw), generati da alleli recessivi, si formano 4 categorie di individui, dove le frequenze non seguono piщ i rapporti mendeliani (per 2 categorie si rivela una minoranza). Le frequenze osservate permettono di riconoscere la frequenza di ricombinazione dei gameti (nei gameti maschili non avviene mai il crossing over). Notando che il 30% dei gameti sono ricombinati, si dice che la distanza tra vg e bw и di 30 cM (centiMorgan). 1 cM corrisponde alla distanza su cui c’и l’1% di possibilitа di crossing-over. In questo modo la frequenza di crossing-over puт venir presa a indice della distanza lineare tra i geni su un cromosoma. In questo modo possono venir compilate mappe genetiche, riportando le posizioni relative di vari geni associati su un determinato cromosoma in base al crossing-over. Un tempo erano basate sul fenotipo, oggi direttamente sul DNA.
Alleli multipli
Il numero massimo di alleli, che ogni individuo possiede in un locus genico и 2, uno per ciascuno dei cromosomi omologhi. И perт possibile un gran numero di alleli diversi in una data popolazione (es. mutazione). Quindi ogni volta che in un locus genico vengono identificati piщ di 2 alleli si ha una serie allelica multipla. Gli eterozigoti portatori si dicono composti. Va quindi definita una gerarchia della dominanza: l'allele dominante su tutta la serie viene indicato con una lettera maiuscola, invece con una minuscola l'allele del tutto recessivo rispetto alla serie. Gli alleli intermedi hanno una lettera minuscola con all'esponente un'altra sigla.
Il sistema ABO dei gruppi sanguigni umani: un classico esempio di allelia multipla
Nel 1900 Landsteiner scopre l’iso-emoagglutinazione ? i globuli rossi di una persona mischiati a quella di un’altra vengono spesso agglutinati ? scoperta di 2 antigeni (o agglutinogeni) sui globuli rossi (A e B). Vengono anche scoperte sostanze agglutinanti che agiscono come anticorpi riconoscendo la presenza di determinati antigeni ? agglutinine (anti-A e anti-B).
Gruppo A ? antigeni A sui globuli rossi, agglutinine anti-B nel plasma
Gruppo B ? antigeni B sui globuli rossi, agglutinine anti-A nel plasma
Gruppo O ? privo di antigeni A e B ma con agglutinine anti-A e anti-B ? donatore universale
Gruppo AB ? antigeni A e B, privo di agglutinine ? ricevente universale
A A
O O AB AB
B B
L’allele IA (per l’antigene A) e l’allele IB (per l’antigene B) sono codominanti, mentre l’allele i (per l’anti-A e l’anti-B) и recessivo. Quindi il gruppo AB и dato da IAIB, mentre il gruppo O и un omozigote recessivo (ii).
Gli antigeni sono di natura glicoproteica, ed appaiono dal 2° mese di vita fetale, aumentando fino alla nascita. La sensibilitа all’agglutinazione si sviluppa fin verso i 20 anni. Oltre che sui globuli rossi, gli antigeni si trovano sui leucociti, sulle piastrine, sulle cellule del fegato…
Le agglutinine appaiono tra il 3° e il 6° mese d’etа (non fetale), crescendo fin verso i 10 anni. Landsteiner spiegт cosм gli incidenti di trasfusione ? 2 gruppi incompatibili (es. A e B) che si mischiano ? le agglutinine si fissano sugli antigeni del globulo rosso estraneo, provocando la distruzione per emolisi e l’agglutinazione dell’emoglobina ? formazione di grumi nei reni, dolori lombari intensi, febbre alta ? morte nel 30% dei casi.
Un altro sistema di gruppi sanguigni importanti и il sistema Rhesus (Rh). Un allele dominante D determina la presenza di un antigene D sugli eritrociti ? Rh-positivi (Rh+), mentre un allele recessivo d ne determina l’assenza ? Rh-negativi (Rh-). In Europa, l’84% и Rh+ e il 16% и Rh-.
Eritroblastosi fetale o malattia emolitica del neonato ? Un uomo Rh+ sposa una donna Rh-. Il primo figlio (Rh+) puт stimolare la madre a produrre anticorpi anti-Rh, che perт non fanno in tempo ad attaccare il feto. I figli seguenti perт potranno essere attaccati da questi anticorpi, che distruggeranno i globuli rossi del feto (emolisi), con pesanti conseguenze. Si puт intervenire in tempo somministrando sostanze D-bloccanti o ricorrendo alla trasfusione.
Morbo di Schridde (piщ raro) ? il neonato viene colpito da un mostruoso edema ? morte.
La distribuzione geografica dei gruppi sanguigni mostra notevoli variabilitа delle frequenze relative (clini) dei vari alleli. Ciт mostra che le frequenze sono influenzate dalla selezione naturale e dal drift piщ che dal caso. I Bororo hanno solo il gruppo O, si ha un’alta frequenza di A nei neri americani, di B negli zingari e di AB negli Ainu ? popolazioni geograficamente isolate o socialmente circoscritte.
L’ereditа legata al sesso
Si parla di sessualitа quando 2 individui aploidi mettono in comune i propri pool ereditari (cromosomi).
Si distinguono 3 modalitа:
Coniugazione (es. batteri): non c’и compenetrazione completa, ma c’и un coniugante maschile che fa da donatore del materiale genetico a un coniugante femminile.
Plasmogamia (es. funghi superiori): messa in comune del citoplasma senza immediata fusione dei nuclei.
Oogamia (es. animali): formazione di gameti durante la gametogenesi (oogenesi e spermatogenesi) che si fondono con quelli di un individuo di sesso opposto con la formazione di uno zigote (fecondazione). Nella gametogenesi avvengono sia la meiosi che processi di morfogenesi.
(scansione)
Un organismo dotato di apparato riproduttivo sia maschile che femminile si dice ermafrodito (es.tenia).
Nelle piante, se i fiori maschili e femminili sono sullo stesso esemplare sono dette monoiche (es. quercia), se sono su piante diverse vengono dette dioiche (es. canapa). Piante che hanno sia fiori ermafroditi che unisessuati sono dette poligame (es. platano). Per evitare l’autofecondazione (che porterebbe alla comparsa di un numero eccessivo di stati omozigoti recessivi), gli organi sessuali e i gameti hanno diversi periodi di maturazione: se maturano prima i maschili ? proterandre, se prima i femminili ? proterogine.
Determinazione del sesso
La maggior parte dei meccanismi di determinazione sono sotto controllo genetico.
1) Meccanismo cromosomico X/Y (pluricellulari) 2) Aplo-diploidia (imenotteri sociali ? api)
3) Equilibrio genetico (drosofila) 4) Effetti di un singolo gene (alghe unicellulari)
Nelle specie a determinazione cromosomica esistono 2 tipi di cromosomi: gli autosomi (o cromosomi somatici) e gli eterocromosomi (o cromosomi sessuali ? X e Y).
Il sesso che puт produrre un solo tipo di gameti (autosomi + X) viene detto omogametico, quello che produce 2 tipi di gameti (autosomi + X o Y) invece eterogametico, e determina il sesso del discendente.
Maschi eterogametici ? maggior parte dei mammiferi e parecchi insetti
Femmine eterogametiche ? farfalle, alcuni uccelli (gallinacei) e parecchi pesci
Determinazione XO ? parecchi insetti (es. cimici). I maschi sono eterogametici, ma danno gameti o con X oppure senza cromosoma sessuale ? un solo X determina il maschio, 2X la femmina.
Questo meccanismo X/Y garantisce una probabilitа uguale (50%) di nascita di maschi o di femmine.
Equilibrio genetico ? nella drosofila, il cromosoma Y и essenziale per la fertilitа maschile, ma non ha nulla a che vedere con la determinazione del sesso. Il cromosoma X determina la femminilitа, mentre i caratteri maschili sono portati dagli autosomi? il sesso и determinato dal rapporto tra X e gli autosomi.
Intersessualitа ? es. drosofila ginandromorfa, in cui una parte dell’animale и maschile, mentre l’altra и femminile. Ciт и causato dalla perdita di un cromosoma X nella 1° divisione del nucleo dell’uovo ? i tessuti derivati dalla cellula con un X sono maschili, quelli da quella con 2X sono femminili.
Nella cellule della donna c’и il corpuscolo di Barr, che negli uomini manca.
Caratteri legati al sesso
Esistono geni sui cromosomi sessuali che vengono trasmessi secondo le modalitа di determinazione sessuale. Cosм, nel sesso eterogametico, i caratteri che si trovano su X saranno sempre manifesti anche se l’allele и recessivo e il portatore и eterozigote, poichй non c’и un cromosoma omologo (X и spaiato). La condizione di questo sesso и detta emizigote ? un carattere recessivo si manifesta anche negli eterozigoti poichй non esiste un cromosoma omologo (es. nell’uomo, malattie portate dal cromosoma X colpiranno sempre i maschi anche se recessive, la donna potrа invece essere portatrice sana).
Inincrocio ? discendenza da matrimoni fra consanguinei ? favorisce la comparsa di caratteri recessivi (che, se portate dal cromosoma X, si manifesteranno negli emizigoti).
Xd Xd
X XXd XXd
Y XdY XdY
Daltonismo ? cecitа parziale al verde e al rosso (protanopia ? cecitа per il rosso con vista parziale per il verde; deuteranopia ? cecitа per il verde con vista parziale per il rosso). И determinato da un allele recessivo d su X. Le femmine eterozigoti sono portatrici sane, mentre le femmine omozigoti e i maschi emizigoti sono malati ? daltonismo molto meno frequente nelle donne.
Ereditа criss-cross (raro) ? il figlio assomiglia alla madre e la figlia al padre (es. donna daltonica con padre sano ? figli malati, figlie sane).
Ci sono oltre 100 anomalie trasmesse col cromosoma X, alcune dominanti (es. colore marrone smalto dei denti), altre recessive (es. daltonismo, ittiosi, rachitismo, emofilia).
Emofilia ? ereditaria, causata da un allele recessivo h su X. Colpisce quasi esclusivamente i maschi, e causa la mancanza del fattore VIII di coagulazione per la formazione della tromboplastina (emofilia A), del IX (emofilia B) o dell’XI (emofilia C). Si manifesta con emorragie esterne (norm. gravi, soprattutto a livello di mucose, sproporzionate e senza arresto) o interne (muscolari, articolari, vascolari, intercellulari (ematomi)), in occasione di traumi puт essere fatale. Come terapia si somministra il fattore VIII fino al 30%, oppure si ricorre a trasfusioni.
Variabilitа genetica
Con variabilitа genetica s’intende l’insieme delle possibilitа di modificazione del patrimonio genetico di una specie, ed и quindi basata sulla plasticitа e duttilitа delle informazioni. Essa и soggetta all’influsso di condizioni esogene (interazioni tra geni e ambiente) o endogene (modifiche nell’ambito individuale e/o specifico).
L’azione della variabilitа genetica e della selezione naturale producono l’insieme dinamico di meccanismi adattativi e sostitutivi chiamato evoluzione.
Le mutazioni
Le mutazioni sono cambiamenti di tipo strutturale o numerico sia a livello somatico che cromosomico e genico; esse possono manifestarsi in tutti gli organismi,provocando trasformazioni piщ o meno evidenti nel fenotipo. Le mutazioni possono essere spontanee o indotte da agenti mutageni di natura fisica o chimica, i principali sono:
1) Radiazioni ionizzanti (raggi ?, ?, ? e X): secondo intensitа e durata possono causare mutazioni cromosomiche (traslocazioni e delezioni) e geniche (alleli mutati dannosi, attivazione di alleli letali, …), come pure somatiche (tumori, …)
2) Raggi ultravioletti (UV, spec. tipo B e C): causano fenomeni di inserzione-delezione, alterando il codice (es. sterilitа e neoplasie maligne).
3) Agenti alchilanti: composti chimici con azione mutagena efficace, causano aploidizzazione e mutazioni gnomiche (es. iprite, azoiprite, e i solfonati di etile ? impiego bellico).
4) Agenti alteranti della mitosi (colchicina, idrato di cloralio, …): intervengono nella mitosi provocando poliploidizzazione.
Sostitutori di N-basi (bromuracile, acido nitroso, etasolfonato di etile, NH2OH): causano sostituzioni di N-basi.
Molte sostanze d’uso quotidiano possono avere, secondo dosaggio o durata di esposizione, attivitа cancerogena.
Le mutazioni si distinguono in due grandi gruppi:
Mutazioni somatiche: compaiono nelle cellule somatiche (non destinate alla riproduzione gamica), sono osservabili direttamente e in genere terminano con la morte dell’individuo, non essendo trasmissibili (es.: tumori).
Mutazioni ereditarie: esse alterano il patrimonio genetico, e quindi vengono trasmesse ai discendenti nei quali si riscontrano i loro effetti, che colpiscono tutte le cellule. Ve ne sono di 3 tipi: mutazioni geniche, cromosomiche e genomiche.
La frequenza di mutazione и determinata con difficoltа, infatti non tutte le mutazioni possono essere evidenziate (es. sindrome di Down, la frequenza и in base all’etа). Si noti poi che l’ambiente puт modificare la frequenza mutativa.
Le mutazioni geniche
Esse colpiscono una regione limitata di un cromosoma, di solito un unico gene o una sua parte, alterandone il carattere o inattivandolo, oppure determinando la comparsa di un nuovo allele. I geni sono relativamente stabili ? mutazioni generalmente molto rare. Non tutte le mutazioni sono dannose, ma piщ un organismo и complesso, maggiori sono le possibilitа che una mutazione sia dannosa. Mutazioni dannose possono provocare la morte anche nei primi stadi di sviluppo. Anomalie genetiche hanno di solito etа tipiche di morte. Esempi: Tay-Sachs ? cecitа e ritardo mentale, morte verso i 4 anni; Fibrosi cistica ? ostruzione bronchioli, difficoltа assorbimento intestinale, morte dopo i 10 anni; Corea di Huntington ? progressivo deterioramento mentale, scoordinamento muscolare, morte dopo i 40-50 anni; Schizofrenia ? riduce la possibilitа di avere discendenti senza influire sulla durata di vita.
1) Albinismo: dipende da un allele autosomico (? non legato al sesso) recessivo raro, che agisce bloccando un enzima (tirosinasi) partecipe della biosintesi della melanina. Gli omozigoti sono totalmente depigmentati (pelle bianca, occhi blu-rossi). Gli eterozigoti invece hanno un’abnorme trasparenza della sclera, pelle piщ chiara e sottile; entrambi hanno anomalie visive.
2) Talassemia o morbo di Cooley: associata a un allele autosomico recessivo t; provoca un’ampia varietа di difetti emoglobinici. И una delle malattie genetiche piщ comuni. La talassemia и caratterizzata da disturbi della sintesi di una o piщ delle 4 catene di globina, che si associano a formare l’emoglobina.Si manifesta con vari livelli di anemia (mancanza di globuli rossi), anisocitosi (globuli rossi di forma variabile), leucocitosi (no. eccessivo di globuli bianchi), iperplasia del midollo osseo (troppo esteso e con troppi elementi nucleati). Allo stato omozigote (tt) causa la talassemia maior, o anemia mediterranea letale, caratterizzata da pallore, pigmentazione bruna delle mani e delle palpebre, milza ingrossata, decalcificazione delle ossa, crescita fisica e mentale ritardata, crisi emolitiche ? morte tra 12 e 15 anni. Lo stato eterozigote (Tt) manifesta una leggera anemia e a volta un colorito giallognolo (anemia minor), ma non и letale.
3) Falcemia o anemia a cellule falciformi: colpisce in modo particolare popolazioni africane portatrici dell’ allele autosomico recessivo s, che alterando la struttura dell’emoglobina normale A in emoglobina S, determina la deformazione di globuli rossi (forma a mezzaluna). Omozigoti (ss) ? anemia assai grave, trombosi alla milza, ai reni, …? morte nell’infanzia. Gli eterozigoti ? trombosi d’altitudine, infarti alla milza, sono perт resistenti ai plasmodi della malaria, poichй i globuli rossi falcemici non consentono ai parassiti di moltiplicarsi.
Le mutazioni cromosomiche
Esse modificano la struttura di uno o piщ cromosomi, alterandone la disposizione delle sequenze in codice, che possono subire distacchi, reinserimenti anomali o perdite. Di solito sono conseguenza dell’azione di agenti mutageni, e possono avere gravi conseguenze sulla vitalitа, sulla fertilitа e sull’adattabilitа dei discendenti. Si distinguono:
Deficienza: perdita di un apice cromosomico, puт condurre all’espressione fenotipica di un allele recessivo, se quello dominante appartiene al tratto cromosomico mancante (pseudodominanza).
Delezione: perdita di un tratto mediano, quasi sempre letale.
Anello: perdita di due estremitа cromosomiche.
Inversione: scambio delle due estremitа cromosomiche, alterazione della disposizione di singoli tratti ? sterilitа e complicazioni nella trasmissione dei caratteri
Delezione e duplicazione: perdita e raddoppio di un tratto mediano, per scambio di estremitа
Traslocazione: scambio di tratti terminali fra non omologhi, provoca lo stesso effetto dell’inversione.

Le mutazioni genomiche
Esse alterano il numero di cromosomi nel nucleo. Se tutto il pool cromosomico и numericamente alterato, si parla di aneuploidia. Se si presenta una condizione multipla nel no. aploide (n), per cui si parla di poliploidia (3n, 5n, 6n, …). Una delle cause principali и la mancata ridistribuzione su cellule figlie di cromosomi duplicati. Nel regno vegetale и relativamente diffusa, e puт condurre a vantaggi, invece negli animali puт portare alla morte. Possono inoltre esistere variazioni del numero di singoli cromosomi? aneusomie, originate da una non-disgiuzione nel corso della meiosi. Ad esempio, nella spermatogenesi si puт avere uno spermatozoo maturo, ma privo del cromosoma mal distribuito (n-1), o con un cromosoma soprannumerario (n+1). La fecondazione di un ovulo normale genererа un individuo affetto da monosomia (2n-1) o da trisomia (2n+1) ? sbilanciamento dell’azione complessiva dei geni.
Sindrome di Down (45, XX/ 45 XY) o trisomia 21: frequenza dello 0,23%, con l’aumento dell’etа materna (> 35 anni), l’incidenza cresce. La trasmissione familiare и molto rara e non determinata solo dalla trisomia 21, ma anche da traslocazione sullo stesso cromosoma. Quadro clinico: statura bassa, capo rotondo, tratti displastici, capelli sottili, pelle secca, viso appiattito, occhi spesso strabici, miopie o cataratte, palpebre dall’aspetto asiatico, naso breve e largo, orecchie tonde e piccole, labbro inferiore sporgente, lingua ruvida, dentatura incompleta e irregolare, tronco ed estremitа tozzi, mignolo spesso breve, cute interdigitale. И tipico il ritardo mentale.
Sindrome di Klinefelter (44, XXY): frequenza da 1:1000 a 1:400. И causata dalla non-disgiunzione dei cromosomi X, che sommandosi al cromosoma Y, danno un cariotipo 44, XXY. Quadro clinico: ipoplasia dei testicoli con assenza di produzione di spermatozoi ? sterili, caratteri sessuali femminili secondari sviluppati, ma con ginecomastia (abbozzo del seno), osteoporosi alla colonna vertebrale, bacino femminile, gambe molto lunghe rispetto al tronco. Nel nucleo delle cellule и presente un corpuscolo cromatico di tipo femminile. Altro sintomo и il ritardo mentale: oltre il 50 % dei casi.
Sindrome di Turner (44, X0) o ipogonadismo femminile o agenesi delle ovaie: frequenza da 1:1000 a 1:400. Causata dalla monosomia del cromosoma X (non-disgiunzione nella R!). Quadro clinico: caratteri non sempre simili. Principali (fin dall’infanzia): crescita corporea scarsa (130-150 cm), tronco tozzo, con torace a scudo, seno ridotto (ipoplasia mammillare), ovaie rudimentali e non funzionali (sterilitа), volto dai tratti fissi (da maschera), bocca piccola, mascelle ridotte, orecchie malformate e attaccate in basso, collo breve e largo, faccia inespressiva. Tra l’attacco delle orecchie e le spalle vi и una plica cutanea assai ampia (pterygium colli). Intelligenza di solito normale,ma tratti psicologici (femminili) restano infantili. Anche se il fenotipo complessivo и femminile, le cellule sono maschili (prive del corpuscolo di Barr).
Altre malattie: - Sindrome di Edwards (Trisomia 17): morte entro il 5° mese
- Sindrome di Smith-Vanwijck (Trisomia 18): morte in etа neonatale
- Sindrome di Patau (Trisomia 13-15): malformazioni cardiache ? morte dopo un anno
Batteri e regolazione genica
I batteri sono microrganismi procarioti in grado di moltiplicarsi per amitosi ? facilmente coltivabili. I batteri sono riuniti in piccoli ammassi chiamati colonie. Tutti i batteri di una colonia sono uguali e costituiscono una classe. Uno dei batteri piщ comuni и il Colibacillo, ospite dell’intestino umano. Puт moltiplicarsi in substrati con sali inorganici e uno zucchero, come il lattosio, un disaccaride formato da glucosio e galattosio, scissi dal colibacillo tramite l’enzima: ?-galattosidasi, che idrolizza i legami. Il colibacillo regola la sintesi della ?-galattosidasi, prodotta solo in presenza di lattosio ? induzione dell’enzima. И possibile evidenziare il fenotipo di 2 ceppi di Colibacillo: Lac+ (normale), se produce la ?-galattosidasi, e Lac- (mutante) se non и in grado di produrla.
Esistono 3 geni che codificano la sintesi di 3 enzimi necessari al colibacillo per utilizzare il lattosio: il gene lac Z, che codifica la ?-galattosidasi, il gene lac Y, che determina una permeasi per il trasporto attivo del lattosio, e il gene lac A che determina una transacetilasi. Geni che codificano enzimi vengono detti strutturali. Vi sono poi altri geni destinati alla regolazione della quantitа di ?-galattosidasi, cioи il gene regolatore lac i, che determina il repressore, il gene promotore lac p, che controlla l’espressione dei geni lac Z,Y,A, e il gene operatore lac o. Tutti questi geni sono contigui sul cromosoma batterico. Questo complesso di geni и detto operone lac ? sistema integrato in cui la sintesi degli enzimi codificati dai geni strutturali dell’operone и coordinata ? i geni regolatori sono controllati da uno stesso repressore.
Il gene lac i codifica per una proteina detta repressore, che si fissa sul gene operatore (o), impedendo alla RNA-polimerasi di attaccarsi al promotore (p). Non c’и quindi trascrizione dei geni Z, Y, A, ? non vengono prodotti i 3 enzimi.
Il lattosio (detto induttore) riconosce il repressore e vi si associa, rendendolo incapace di riconoscere o e di fissarvisi. Si ha quindi un’induzione per derepressione, che porta alla produzione dei 3 enzimi.
Gli alleli mutanti dell’operone lac, possono interessare vari geni, che gli appartengono: i mutanti di z (Z-) non sanno produrre la ?-galattosidasi in presenza del lattosio, e sono lac-. Mutanti di Y (Y-) hanno una permeasi inattiva ? il lattosio non puт entrare nelle cellule ? il fenotipo и lac-, malgrado la presenza di ?-galattosidasi.
Cenni di ingegneria genetica: la clonazione e la transgenesi
Decorso della clonazione ? Rottura delle cellule col gene da clonare mediante un frullatore e per trattamento con un detergente. Estrazione del DNA: le molecole di DNA vengono avvolte attorno a una bacchetta di vetro, che poi viene estratta dalla miscela di cellule rotte. Taglio del DNA cellulare in corrispondenza di particolari zone, tramite endonucleasi di restrizione (forbici molecolari). Viene anche tagliato il vettore di clonaggio (fago o plasmide) ? breve tratto di DNA circolare infettivo, che puт passare attraverso la membrana delle cellule e moltiplicarsi al loro interno. Esso viene estratto da batteri. Miscelazione dei due tipi di DNA. Legame dei frammenti di DNA (umano o altro) a vettori di clonaggio tramite DNA-ligasi. L'inserimento produce una molecola di DNA chimeriso (in parte gene e in parte vettore di clonaggio) o DNA ricombinante. Trasferimento del DNA in una cellula-ospite (batterio o lievito) grazie ai vettori di clonaggio. Formazione di un clone tramite moltiplicazione della cellula ospite Ogni clone contiene, oltre al proprio DNA, anche il frammento di DNA: cosм, questo gene puт essere trasferito in una cellula di altro tipo.
La clonazione genica serve perciт a trasferire da un organismo a un altro frammenti di DNA, alcuni dei quali altereranno permanentemente, in modo utile e prevedibile, le caratteristiche biochimiche dell'organismo ospite. Si noti che i ceppi bat¬terici utilizzati per la clonazione genica non sopravvivono bene fuori dal laboratorio; in gran parte sono geneticamente mutilati e spesso hanno bisogno di speciali sostanze nutritive per poter crescere.
Transgenesi ? si ottengono ceppi di cellule embrionali indifferenziate in coltura, manipolabili come cellule somatiche. In seguito, tramite transfezione e selezione, si ottengono cellule embrionali modificate col gene voluto. Queste cellule modificate vengono impiantate in una blastociste assieme alle cellule embrionali normali, poi si reimpianta la blastociste nell’organismo (es. topo). Si ottengono cosм topi transgenici (chimere), formati in parte da cellule normali e in parte da cellule modificate. Questi topi vengono incrociati con quelli che hanno fornito le blastocisti, si rivelano tra i discendenti i transgenici eterozigoti e si reincrociano tra loro, ottenendo infine topi transgenici omozigoti.
Altri importanti metodi per ottenere organismi transgenici (es. mais) sono l’infezione tramite organismo-taxi e il cannone a DNA (vedi geo).
Gemellaritа
In Europa l’1% delle gravidanze sono gemellari. Esistono due tipi di gemelli: 1) gemelli dizigotici: (o biovulari o fraterni), si hanno quando 2 ovuli diversi sono fecondati da 2 spermatozoi diversi, piщ o meno allo stesso tempo; 2) gemelli monozigotici: derivano da cellule staccatesi nei primi stadi di sviluppo di un unico zigote, nato dalla fecondazione di un unico ovulo. Tali gemelli saranno identici, sia nel genotipo, sia nel fenotipo. Possono formarsi:
1) per separazione delle prime cellule dopo la 1° divisione dello zigote
2) per formazione di una singola massa di cellule che poi si divide
3) per sviluppo di 2 masse cellulari interne
4) per divisione molto tardiva ? incompleta ? gemelli coniugati o siamesi.
Negli annessi embrionali possono verificarsi 4 possibilitа:
A) amnios, corion e placenta separati (mono e di) B)amnios,corion separati,placenta unita (mono e di)
C) amnios separati, corion e placenta uniti (mono) D) amnios, corion e placenta uniti (mono)

I gemelli sono molto utili per determinare e studiare l’ereditarietа. Infatti il confronto tra gemelli mono e dizigotici sono uno dei maggiori strumenti informativi nella genetica umana. Un esempio и la presenza delle lentiggini: nelle coppie di MZ, la percentuale di concordanza и del 100%, invece nei DZ и del 73% ? la presenza delle lentiggini и dovuta al genotipo. In altri casi c’и perт l’impatto dell’ambiente, che ha un ruolo assai rilevante.
Ereditа e ambiente
I fattori ereditari e quelli ambientali interagiscono a vari livelli, con diversa intensitа, per determinare le caratteristiche individuali e/o specifiche.
I contributi di uno o dell’altra parte (ambiente-ereditа) sono alquanto variabili, infatti ci sono alcuni caratteri determinati unicamente dall’ereditа (colore occhi), altri invece solo dall’ambiente (ferite). Ma la gran parte dei caratteri sono dovuti a interazioni (sinergismi) tra geni e ambiente. Un esempio и il colore del pelame nei conigli e nei gatti siamesi per ?T, o la formazione di clorofilla solo in presenza di luce, o la fioritura solo a determinate durate d’illuminazione, e infine le malattie infettive di origine ambientale, il cui impatto dipende dai vari tipi di genotipi, che possono determinare sensibilitа immunologiche (es. peste ? monatti).
La variabilitа mostrata da molti caratteri non и adatta alla classificazione in gruppi genotipici separati (variabilitа discontinua), ma forma uno spettro di fenotipi che si fondono passando da un tipo all’altro (variabilitа continua). I caratteri qualitativi sono in genere determinati da un solo allele, quelli quantitativi (statura, peso) da numerosi geni (sistemi poligenici) ? l’effetto di ogni singolo gene и impercettibile. Inoltre la variabilitа fenotipica nei caratteri quantitativi ha una componente ambientale relativamente grande, e una componente genetica piccola.
Studiando un carattere quantitativo in una popolazione di grandi dimensioni si osserva che pochi individui possiedono fenotipi estremi, mentre la maggior parte si trova verso valori medi (es. statura). Riportando i risultati su un grafico, si ottiene una curva di frequenza a campana (curva di Gauss), detta anche distribuzione normale (fu Galton a introdurre nella genetica metodi d’analisi statistica). Nasce cosм la biometria, concepita per evidenziare i fenomeni evolutivi.
Il valore fenotipico medio di un carattere con distribuzione normale и la media aritmetica. La grandezza piщ utile и la deviazione standard (? o DS), che su un grafico corrisponde al punto di massima pendenza. Essa indica la dispersione dei singoli valori. Altra grandezza и la varianza (?2), essenziale negli incroci negli allevamenti, dato che essa puт essere divisa in diverse componenti (genotipo, ambiente…).
Deriva genetica (Drift) e migrazione
Immaginiamo un’isola con 30 persone sopravvissute ad una catastrofe, tra cui un capo tribщ eterozigote per un’anomalia alla vista (acromatopsia). Anni dopo, il 50% dei discendenti и malato ? discendenza del capo di allora, in cui il carattere singolare si и fissato grazie alla riduzione numerica della popolazione. Un altro esempio и l’albinismo, che in alcuni paesi alpini isolati si manifesta 100 volte maggiormente. Il fenomeno и piщ evidente quando le dimensioni di una popolazione hanno subito una drastica riduzione e quando la popolazione й rimasta geograficamente isolata. Si dice che l’allele singolare и stato fissato, mentre gli altri sono pressochй estinti. A meno che non ci siano mutazioni o migrazioni, la fissazione e l’estinzione sono irreversibili. Nel caso dell’isola, dato il ristretto no. di fondatori, si parla di effetto del fondatore (founder effect), per cui la distribuzione genica di un isolato (comunitа con pochissimi immigranti e separata dal resto della popolazione) riflette la distribuzione dei geni dei fondatori. La concentrazione di una singolaritа и segno tipico di un isolato: la presenza di certi geni nei fondatori e l’isolamento sono dovuti al caso.
Su una singola generazione il caso puт avere diverse conseguenze:
1) l’evento piщ probabile и la nascita di figli con frequenza genica analoga ai genitori
2) in media piщ una popolazione и grande, meno и soggetta a deviazioni delle frequenze geniche
3) l’accumulo di eventi casuali porterа in periodi lunghi alla fissazione di un allele e all’estinzione di tutti gli altri: la probabilitа di fissazione dipende dalla frequenza iniziale dell’allele
4) il tempo necessario per la fissazione o l’estinzione и in media una funzione delle dimensioni della popolazione.
Il processo per cui le frequenze geniche sono soggette a fluttuazioni dovute al caso viene chiamato deriva genetica (drift) ? tale fenomeno и una causa di variazione delle frequenze geniche nel tempo. Esso ha effetti tanto maggiori quanto minore и la popolazione.
Gruppi separati e dispersi sono il risultato di migrazioni, che possono sia frammentare la popolazione originale in piccoli gruppi (es. tribщ), sia accrescere l’omogeneitа di una popolazione (possibile genesi delle etnie e delle razze umane). In qualsiasi societа qualche movimento migratorio й inevitabile (matrimoni). Un effetto della migrazione и l’eliminazione parziale degli effetti del drift genetico ? maggiore и la migrazione, minori saranno le conseguenze dovute al drift. Dato che le migrazioni tra popolazioni limitano gli effetti del drift, alla fine vi sarа un equilibrio tra migrazione e drift. Quando le migrazioni sono unidirezionali (cioи implicano scambio di geni a bassa frequenza e in una sola direzione), si parla di flusso genico, che puт mutare la costituzione genetica delle popolazioni coinvolte.
L’equilibrio di Hardy-Weinberg
In una popolazione ideale che sia panmittica (cioи vi siano solo incroci casuali), nella quale non vi siano mutazioni, nй selezione (gli individui hanno uguale possibilitа di sopravvivere) nй movimenti migratori, e che sia formata da un numero elevato di individui (? per cui possono essere usate le leggi delle probabilitа), le frequenze alleliche rimangono costanti da una generazione all’altra. L’equilibrio и espresso dalla relazione p2 + 2pq + q2 = 1, dove p и la frequenza di un allele A e q la frequenza dell’altro allele a (ammettendo che nel pool genico della popolazione ci siano solo quei 2 alleli, e che quindi p + q = 1). p2 indica la frequenza di omozigoti per A, 2pq al frequenza di eterozigoti e q2 la frequenza di omozigoti per a. Nel caso di piщ di 2 alleli per un certo gene nel pool genico della popolazione (allelia multipla), la legge и comunque applicabile, anche se l’equazione all’equilibrio и piщ complessa.
Nella realtа, non esiste una popolazione che rispetti questi limiti (dove non vi siano mutazioni…), questa legge и perт molto importante perchй permette di stimare l’entitа del cambiamento dovuto a questi fattori e trovarne le cause. Per esempio si possono calcolare le frequenze alleliche di una popolazione, che quindi in una popolazione ideale rimarranno costanti nel tempo: eseguendo questi calcoli per piщ generazioni, и possibile individuare le variazioni nel pool genico tra la popolazione ideale (secondo Hardy-Weinberg) e quella reale (calcolata) e cercare di stabilirne le cause.
I processi riproduttivi
Esistono due modalitа riproduttive:
1) asessuata (agamica) ? da un solo organismo se ne formano due identici, per amitosi o per mitosi. La quantitа di DNA rimane costante, e i discendenti hanno le stesse caratteristiche genetiche degli ascendenti. Questo sistema и importante per l'estensione di una popolazione, o la rigenerazione di certi organi o ¬tessuti.
2) sessuale (gamica): da 2 organismi ne nasce 1, grazie a cellule sessuali (gameti) altamente specifiche, tramite la meiosi. Essa garantisce una ricombinazione dei caratteri ereditari, che permette la formazione di ibridi, con maggior potere adattativo, nell'ambito della selezione naturale.